根據(jù)GBT 10345-2007《白酒分析方法》和GB 8315-2008 《食品添加劑 己酸乙酯》標(biāo)準(zhǔn) ,山東譜析科學(xué)儀器有限公司采用氣相色譜儀PEG-20M毛細(xì)管柱測定己酸乙酯含量測定,結(jié)果滿意。
(1)原理
樣品被氣化后,隨同載氣進(jìn)入色譜柱,利用被測定的各組分在氣液兩相中具有不同的分配系數(shù),在柱內(nèi)形成遷移速度的差異而得到分離。分離后的組分先后流出 色譜柱,進(jìn)入氣相色譜儀氫火焰離子化檢測器(FID),根據(jù)色譜圖上各組分峰的保留值與標(biāo)樣相對照進(jìn)行定性;利用峰面積(或峰高),以內(nèi)標(biāo)法定量。
(2)儀器和材料
氣相色譜儀:配備有氫火焰離子化檢測器(FID)的GC-17氣相色譜儀。
毛細(xì)管柱:LZP-930白酒分析專 用柱(柱長18m,內(nèi)徑0.53mm)或PEG-20M毛細(xì)管色譜柱(柱長35~50m,內(nèi)徑0.25mm,涂層0.2μm),或其他具有同等分析效 果的毛細(xì)管色譜柱。
填充柱:柱長不短于2m。
載體:Chromosorb W(AW)或白色擔(dān)體102(酸洗,硅烷化),80~100目。
固定液:20% DNP(鄰苯二甲酸二壬酯)加7%吐溫-80,或10% PEG(聚乙二 醇)1500或PEG 20M。
微 量進(jìn)樣器:10μL,1μL。
(3)試劑和溶液
乙醇溶液(60% vol):用乙醇(色譜純)加水配制。
己酸乙酯溶液2%(體積分?jǐn)?shù)):作標(biāo)樣用。吸取己酸乙酯(色譜純)2mL,用乙醇溶液定容至100mL。
乙酸正戊酯溶液2%(體積分?jǐn)?shù)):使用毛細(xì)管柱時(shí)作內(nèi)標(biāo)用。吸取乙酸正戊酯(色譜純)2mL,用乙醇溶液定容至100mL。
乙酸正丁酯溶液2%(體積分?jǐn)?shù)):使用填充柱時(shí)作內(nèi)標(biāo)用。吸取乙酸正丁酯(色譜純)2mL,用乙醇溶液定容至100mL。
(4)分析步驟 除標(biāo)樣改為己酸乙酯溶液外,其他操作同乙酸乙酯。
①色譜參考條件
毛細(xì)管柱
載氣(高純氮):流速為0.5~1.0mL/min,分流比:約37:1,尾吹20~30mL/min。
氫氣:流速為40mL/min。
空氣:流速為400mL/min。
檢測器溫度(TD):220℃。
檢測器溫度(TD):220℃。
注樣器溫度(TJ):220℃。
柱溫(Tc):起始溫度60℃,恒溫3min,以3.5℃/min程序升溫至180℃,繼續(xù)恒溫10min。
填充柱
載氣(高純氮):流速為150mL/min;(1號修改單將流速改為50mL/min)。
氫氣:流速為40mL/min。
空氣:流速為400mL/min。
檢測器溫度(TD):150℃。
注樣器溫度(Tj):150℃。
柱溫(Tc):90℃,等溫。
載氣、氫氣、空氣的流速等色譜條件隨儀器而異,應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)選擇蕞佳操作條件,以內(nèi)標(biāo)峰與樣品中其他組分峰獲得完 全分離為準(zhǔn)。
②校正因 子(f值)的測定
吸取己酸乙酯溶液1.00mL,移入100mL容量瓶中,加入內(nèi)標(biāo)溶液1.00mL,用乙醇溶液稀釋至刻度。上述溶液中己酸乙酯和內(nèi)標(biāo)的濃度均為0.02%(體積分?jǐn)?shù))。待色譜儀基線穩(wěn)定后,用微 量進(jìn)樣器進(jìn)樣,進(jìn)樣量隨儀器的靈敏度而定。記錄己酸乙酯和內(nèi)標(biāo)峰的保留時(shí)間及其峰面積(或峰高),用其比值計(jì)算出己酸乙酯的相對校正因 子。
校正因 子按下式計(jì)算。
f A1/A2×d2/d1
式中f——己酸乙酯的相對校正因 子
A1——標(biāo)樣f值測定時(shí)內(nèi)標(biāo)的峰面積(或峰高)
A2——標(biāo)樣f值測定時(shí)己酸乙酯的峰面積(或峰高)
d2——己酸乙酯的相對密度
d1——內(nèi)標(biāo)物的相對密度
③樣品測定
吸取樣品10.0mL于10mL容量瓶中,加入內(nèi)標(biāo)溶液0.10mL,混勻后,在與f值測定相同的條件下進(jìn)樣,根據(jù)保留時(shí)間確 定己酸乙酯峰的位置,并測定己酸乙酯與內(nèi)標(biāo)峰面積(或峰高),求出峰面積(或峰高)之比,計(jì)算出樣品中己酸乙酯的含量。
(5)結(jié)果計(jì)算
樣品中的己酸乙酯含量按下式計(jì)算。
X1=f×(A3/A4)×I×10-3
式中X1——樣品中己酸乙酯的質(zhì)量濃度,g/L
f——己酸乙酯的相對校正因 子
A3——樣品中己酸乙酯的峰面積(或峰高)
A4——添加于酒樣中內(nèi)標(biāo)的峰面積(或峰高)
I——內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度(添加在酒樣中),mg/L
(6)精密度
所得結(jié)果應(yīng)表示至兩位小數(shù)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú) 立測定結(jié)果的絕 對差值,不應(yīng)超過平均值的5%。